基本信息
- 项目名称：
- 蝎毒多克隆抗体的制备以及入脑成分的检测
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 实验使用自制的蝎毒多克隆抗体特异性识别的蝎毒进入小鼠脑部的成分，从而获得蝎毒中对于大脑起作用的成分。
- 详细介绍：
- 本实验通过制备蝎毒的多克隆抗体，针对性地识别蝎毒中的多种蛋白成分，并进行了抗体的多步纯化。实验中设定了长期注射蝎毒的实验组和注射生理盐水的空白组，获得两组的大脑总蛋白进行免疫印迹，从而识别出进入小鼠脑部的蛋白成分，可以进行后续的鉴定工作。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本课题为了探讨蝎毒对该类神经疾病的治疗机制以及寻找并分离有效神经营养成分。本实验拟通过制备蝎毒的多克隆抗体，运用蛋白免疫印迹的方法，特异地显示出蝎毒成分在小鼠大脑中的分布，从而寻找到蝎毒进入大脑并且对脑部起到一定的刺激营养作用的有效成分，为最终确定蝎毒的有功能成分奠定基础。
科学性、先进性及独特之处
- 蝎子是我国传统的名贵中药。全蝎的药用有效部分是蝎毒，蝎毒对于多种脑神经疾病有治疗作用，然而对其机制研究尚待完善。本课题自制蝎毒多克隆抗体，通过蛋白免疫印迹的方法，特异性显示进入大脑的蝎毒蛋白，为进一步质谱分析定性蛋白奠定了基础，利用这种方法进一步寻找蝎毒中的有效成分，这是本实验的独特之处。
应用价值和现实意义
- 探索蝎毒对神经退行性疾病的治疗作用的机制，为给类疾病的药物研发提供前期实验基础。从蝎毒中得到单一成分或者简单混合物的有效活性成分。以期进一步扩大蝎毒的临床应用市场，加快对其的研究，开发和利用，制成高效低毒的新型制剂，更好地服务于社会。
学术论文摘要
- 利用自制的兔抗蝎毒抗体，运用蛋白免疫印迹的方法来特异地显示出蝎毒成分在小鼠大脑中的分布。制备兔抗蝎毒的多克隆抗体，并通过双向免疫扩散实验测定抗体效价。设置对照组和长期注射蝎毒的小鼠实验组，进行大脑蛋白的蛋白免疫印迹（Western-blotting），从而寻找到进入大脑的蝎毒有效成分。通过双向免疫扩散实验，得到制备的兔抗蝎毒的多克隆抗体，效价为1:150.通过Western-blotting特异性识别进入大脑的蝎毒成分，进行质谱鉴定的定性分析，并进行纯化分离。通过本课题探索蝎毒对神经退行性疾病的治疗作用的机制，为给类疾病的药物研发提供前期实验基础。
获奖情况
- 第五届大连医科大学科技创新比赛 二等奖
鉴定结果
- 无
参考文献
- 免疫学双语实验技术指导，【M】北京：科学出版社 东亚钳蝎蝎毒蛋白的免疫学【J】研究河北农工业技术示范学院学报 双线观点用及质谱分析与蛋白质组研究【J】第四军医大学学报 蝎毒的采集，提取，分离，鉴定研究【J】，中成药 应用高效液相色谱法比较我国不同地区东亚钳蝎毒【J】，沈阳药科大学学报， 蝎毒的采集，提取，分离，鉴定研究【J】，中成药
同类课题研究水平概述
- 根据文献的报道，张景海等用Glaspac Column TSK G3000 SW胶过滤，离子交换高效液相色谱分离我国不同地区东亚钳蝎种类及含量。王琳等则首次分离纯化出分子量在2万以上的蝎毒蛋白，打破了以往国内外对蝎毒的研究报道均认为蝎毒是多肽的混和物 ，说明了蝎毒的化学成分是复杂的，蝎毒的广泛药理学性质可能与这些不同的成分有关。在国内外对于蝎毒在神经疾病方面的应用的研究也分布在癫痫，镇痛和神经退行性病变如老年痴呆和帕金森疾病。
