基本信息
- 项目名称：
- 小鼠再生肝抗GalN/LPS联合诱导急性肝损伤UCP2作用研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本研究利用京尼平，研究UCP2在小鼠再生肝抗GalN与LPS联合诱导急性肝损伤中的作用。实验结果显示，GalN/LPS损伤后，京尼平处理组小鼠血清ALT含量显著高于单纯肝部分切除组(P<0.01)。肝组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量也显著升高(P<0.05)。结果说明UCP2可能通过限制活性氧（ROS）产生的方式，在小鼠再生肝抗GalN/LPS联合诱导的急性肝损伤中发挥保护作用。
- 详细介绍：
- 本实验采用清洁级6～8周健康雄性昆明种小鼠，利用Higgins&Anderson法[9]施行小鼠68%肝切除。假手术组除不行肝部分切除外，其余操作与手术组相同。实验分成死亡率实验与形态学血清学试验两个部分，分组情况：死亡率实验：假手术+损伤(SO+GalN/LPS)10只；肝切+损伤(PH+GalN/LPS)10只； 肝切+京尼平+损伤(PH+Genipin+GalN/LPS)10只，形态学血清学实验：正常组(Normal)9只；假手术(SO)10只；假手术+损伤(SO+GalN/LPS)10只；肝切(PH)10只；肝切+损伤(PH+GalN/LPS)10只；肝切+京尼平+损伤(PH+Genipin+GalN/LPS)10只；肝切+京尼平(PH+Genipin)10只。通过观察各组的组织形态学，血清转氨酶，MDA,SOD含量并进行统计学分析得到实验结果。结果说明UCP2可能通过限制活性氧（ROS）产生的方式，在小鼠再生肝抗GalN/LPS联合诱导的急性肝损伤中发挥保护作用。
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作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 临床腹部外科手术、肝肿瘤等均可导致肝损伤，肝损伤与修复是临床常见又亟待解决的难题。已知肝部分切除后再生，再生肝有强的抗损伤能力，但机制仍不明。如阐明，无疑对临床肝损伤与修复机制的阐明具有重要的理论与实际意义。本项目通过制备小鼠再生肝模型，以肝细胞线粒体内膜解偶联蛋白为观察对象，采用半乳糖胺/脂多糖联合诱导肝损伤，应用UCP2特异性抑制剂，观察UCP2在再生肝抗损伤中的作用及可能的机制。
科学性、先进性及独特之处
- 科学性:依据随机、对照和重复三大原则。采取组间对照和自身前后对照，并进行相应统计分析。并通过形态学、血清学、生化学等指标，层层深入，相互佐证，保证了实验结果的准确和科学性。先进性:围绕肝细胞线粒体内膜蛋白的功能，采用特异性抑制剂，通过测定脂质过氧化产物，鉴定UCP2的作用机制。将蛋白功能、线粒体功能与细胞抗损伤功能紧密联系在一起。独特之处:将京尼平应用于再生肝抗损伤研究中，国内外属首例。
应用价值和现实意义
- 本研究结果表明，再生肝具有很强的抗半乳糖胺/脂多糖损伤的能力，线粒体内膜蛋白UCP2可通过抑制活性氧（ROS）水平，起到细胞保护作用。这个结论从理论上明确了UCP2 的细胞保护功能，为临床肝损伤及其修复提供了新的作用靶点。同时，抑制ROS水平也是临床肝病防治的一个策略。
学术论文摘要
- 在成熟肝组织中的正常肝细胞不表达解偶联蛋白2（uncoupling protein 2，UCP2），但肝部分切除后（partial hepatectomy，PH）再生肝细胞UCP2的表达显著增加。已知再生肝具有很强的自身保护作用，但其保护机制目前仍不十分清楚。UCP2表达的增强与再生肝抗损伤能力的关系目前尚不清楚。本研究通过建立小鼠再生肝模型，利用UCP2特异性抑制剂京尼平，研究UCP2在再生肝抗半乳糖胺（GalN）与脂多糖（LPS）联合诱导急性肝损伤中的作用。实验结果显示，GalN/LPS损伤后，京尼平处理组小鼠血清ALT含量显著高于单纯肝部分切除组(P<0.01)。肝组织脂质过氧化产物丙二醛（MDA）含量也显著升高(P<0.05)。结果说明UCP2可能通过限制活性氧（ROS）产生的方式，在小鼠再生肝抗GalN/LPS联合诱导的急性肝损伤中发挥保护作用。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- Qiong WU, Dezheng GONG, Nan TIAN,et al. Protection of Regenerating Liver after Partial Hepatectomy from Carbon Tetrachloride Hepatotoxicity in Rats: Roles of mitochondrial uncoupling protein 2 and ATP stores. Digestive Diseases and Sciences 2009；54(9):1918-25 Yingli Shang, Yong Liu , Lei Du ,et al. Targeted expression of uncoupling protein 2 to mouse liver increases the susceptibility to lipopolysaccharide/galactosamine-induced acute liver injury. Hepatology Volume 50 ( 4), 1204 – 1216
同类课题研究水平概述
- 众所周知，再生肝有较强的抗损伤能力，新生肝、胎肝也是如此。本项目即是利用再生肝UCP2高表达现象和较强的自身保护特性。对再生肝抗损伤机制研究，目前主要研究某些因子如肝刺激因子（HSS）、肝细胞生长因子（HGF）等促细胞增殖效应和前列腺素、金属硫蛋白等物质的保肝效应。但关于抗损伤的细胞内机制研究并不多见，也不十分明确，原因之一是没有寻找到肝细胞内自由基产生和清除的代谢机制，而这很可能是再生肝抗损伤的关键问题。鉴于再生肝内UCP2表达增加，非酒精性肝病、脂肪肝等与UCP2存在的密切关系，对UCP2的深入研究，可能为再生肝抗损伤机制、临床肝病防治提供重要的线索。本项目以肝细胞为研究对象，一是因为再生肝具有很强的自身保护现象，但机制仍不明确；二是因为再生肝UCP2表达丰富，但功能不清楚；三是因为从活性氧（自由基）稳态与调控角度研究肝损伤与修复机制，目前尚无文献报导。
