基本信息
- 项目名称：
- Localization of Trefoil Factor 2 in Submandibular
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 三叶因子2在大鼠颌下腺的定位，为颌下腺生物活性物质的研究提供形态学资料。通过免疫组化和RT-PCR技术在蛋白和基因水平揭示三叶因子2在不性别大鼠颌下腺的定位与表达。
- 详细介绍：
- 三叶因子家族（trefoil factor family，TFF）是一群主要由胃肠道黏液细胞分泌的小分子多肽，具有黏膜保护与修复功能。传统认为颌下腺是外分泌腺，但迄今已在大鼠颌下腺内发现和分离出30多种生物活性肽，在内环境自稳机制中发挥独特的作用，另有研究表明颌下腺生物活性物质的合成和分泌存在性别差异。 本实验应用免疫组化技术，光镜下对阳性结果进行定位分析，用Motic软件进行图像半定量分析，每张切片随机取5个视野，测定大鼠颌下腺TFF2蛋白的积分光密度。应用RT-PCR技术，反应产物于1.5%琼脂糖中电泳，用UVP GELDOC-IT凝胶成像系统观察并成像。根据TFF2与GAPDH基因条带的吸光度比值对TFF2 mRNA表达水平进行半定量分析。 虽然关于TFF2与消化性溃疡之间关系的研究较多，但是关于TFF2在大鼠颌下腺定位的研究还没有报道。我们的研究通过定位，推测TFF2是通过腔分泌的方式释放入血发挥黏膜保护和修复的作用；而且关于TFF2在不同性别大鼠颌下腺的定位表达也未见报道，这正是我们实验的创新点。我们研究的意义在于通过研究三叶因子2在作为唾液腺之一的颌下腺的定位与表达，为揭示三叶因子2在消化道溃疡中作用提供形态学和分子学依据；也为临床胃肠道及口腔溃疡防治提供新思路。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 三叶因子2在大鼠颌下腺的定位，为颌下腺生物活性物质的研究提供形态学资料。通过免疫组化和RT-PCR技术在蛋白和基因水平揭示三叶因子2在不性别大鼠颌下腺的定位与表达。
科学性、先进性及独特之处
- 本实验利用HE染色技术对大鼠颌下腺进行形态学观察，并利用免疫组化技术检测三叶因子2在大鼠颌下腺的表达，并比较性别表达差异。利用RT-PCR技术从基因水平检测三叶因子2在不同性别大鼠表达的强弱差异。三叶因子2在不同性别大鼠表达的比较国内外尚无报道。
应用价值和现实意义
- 三叶因子2作为黏膜保护因子具有促进上皮迁移，保护黏膜，修复黏膜损伤的作用。研究其在作为唾液腺之一的颌下腺的定位与表达，为揭示三叶因子2在消化道溃疡中作用提供形态学和分子学依据。
学术论文摘要
- 目的：探讨三叶因子2（TFF2）在大鼠颌下腺的定位及其在不同性别中的表达差异。方法：对雌雄各6只SD大鼠颌下腺进行TFF2免疫组织化学显色和RT-PCR检测TFF2mRNA表达。结果：TFF2免疫反应阳性物质主要位于闰管、纹状管和小叶间导管上皮细胞胞质，特别是近管腔面处更多，纹状管和小叶间导管管腔内亦有阳性物质分布；颗粒区管的少颗粒暗细胞或无颗粒细胞强阳性；多颗粒细胞弱阳性或阴性。雄性大鼠的颌下腺表达TFF2mRNA明显多于雌性。结论：TFF2主要分布在颌下腺导管的上皮细胞，以雄性丰富，且主要以腔分泌方式发挥作用。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 由于时间及物力原因，未及鉴定。
参考文献
- 1、 黄晶. 大学生口腔溃疡60例分析[J]. 黑龙江医学, 2009, 33(3): 235-236. 2、 张绍荣,宋于刚,陈学清，等. 三叶因子2基因治疗对实验性大鼠胃溃疡愈合影响的研究[J]. 中国实用内科杂志, 2006, 26(18): 1418-1420. 3、Devine D A, High A S, Owen P J, et al. Trefoil factor expression in normal and diseased human salivary glands [J]. Hum Pathol, 2000, 31(4): 509-515. 4、Jagla W, Wiede A, Hinz M, et al. Secretion of TFF-peptides by human salivary glands[J]. Cell Tissue Res, 1999, 298(1): 161–166.
同类课题研究水平概述
- 三叶因子家族（trefoil factor family，TFF）是近年来研究较多的一群主要由胃肠道黏液细胞分泌的小分子多肽，又称三叶肽(trefoil peptide)。在哺乳动物体内，三叶肽具有黏膜保护与修复、肿瘤抑制、信号传导、诱导细胞凋亡等功能。 1982年，Jorgensen等从猪胰腺提纯胰岛素过程中分离到了TFF2，分子由106个氨基酸组成含有2个对称的P结构域，其位于第6位与第104位的半胱氨酸残基（P结构域外）亦形成1个二硫键（第7个分子内二硫键），使其结构极其稳定。TFF2主要在胃体及胃窦的黏液颈细胞和下段十二指肠腺表达，此外，在黏膜损伤部位如消化性溃疡、炎症性肠病及胃肠道肿瘤、胰腺癌、肠增生性息肉、Barrett食管等均可见TFF2表达增高。最近有研究发现TFF2在人胃液中亦有表达，其浓度呈显著的昼夜改变并受饮食影响，夜间睡眠状态下最高(7．9ug/m1)，下午最低(0．29ug/m1)，进食后较餐前降低。 研究发现TFF2在体外能抑制平滑肌的收缩，皮下注射及口服TFF2均能抑制小肠蠕动。Farrell等研究发现缺乏TFF2老鼠的胃黏膜厚度及黏膜细胞增生率均明显下降，壁细胞数量及胃酸分泌量增多2倍。这就提示TFF2在大鼠体内具有防治溃疡的作用。 虽然关于TFF2与消化性溃疡之间关系的研究较多，但是关于TFF2在大鼠颌下腺定位的研究还没有报道。我们的研究通过定位，推测TFF2是通过腔分泌的方式释放入血发挥黏膜保护和修复的作用。关于TFF2在不同性别大鼠颌下腺的定位表达也未见报道，这正是我们实验的创新点。
