基本信息
- 项目名称：
- 从延胡索中分离生物碱的产业化研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 科技发明制作A类
- 简介：
- 本研究采用硅胶柱层析和pH-区带精制逆流色谱两种方法，分别从延胡索中分离得到了去氢紫堇碱，通过去氢紫堇碱的回收率及生产成本的预算发现，pH- 区带精制逆流色谱在分离去氢紫堇碱时优于硅胶柱层析法。
- 详细介绍：
- 首先，通过HPLC跟踪检测确定延胡索乙醇提取物中季铵类生物碱的初步分离步骤；然后，通过传统的硅胶柱层析方法和新兴的pH-区带精制逆流色谱分别从延胡索中分离去氢紫堇碱。实验结果表明，通过硅胶柱层析法分离得到的去氢紫堇碱纯度大于99%，回收率（以样品计）大于75%；通过pH-区带精制逆流色谱从延胡索中分离得到去氢紫堇碱和巴马汀，纯度皆大于90%，此法在放大试验中分离得到的去氢紫堇碱纯度大于98%，回收率（以样品计）大于90%，为去氢紫堇碱的产业化研究提供了一定的基础。通过比较传统的硅胶柱层析和新型的pH-区带精制逆流色谱分离得到的去氢紫堇碱回收率以及两个方法的经费预算可得，通过pH-区带精制逆流色谱分离延胡索中的去氢紫堇碱要优于硅胶柱层析法。
作品专业信息
设计、发明的目的和基本思路、创新点、技术关键和主要技术指标
- 设计发明目的：为了更好的学习和运用本专业的相关知识，进一步掌握天然药物化学的知识，寻找分离延胡索中生物碱的方法并将其用于产业化生产。 基本思路：采用中药分离技术中常用的硅胶柱层析和pH-区带精制逆流色谱对延胡索中的生物碱进行分离。 创新点：首次通过pH-区带精制逆流色谱从延胡索中分离得到去氢紫堇碱和巴马汀，该法操作简单，样品回收率高于75%（以药材计），所需时间短。通过硅胶柱层析分离得到的去氢紫堇碱纯度高于99%，操作简单，样品回收率高于60%（以药材计）。 技术关键：寻找硅胶柱层析中合适的洗脱剂及pH-区带精制逆流色谱中合适的溶剂体系。 主要技术指标：分离得到的去氢紫堇碱和巴马汀纯度大于90%，回收率（以样品计）大于70%。
科学性、先进性
- 去氢紫堇碱和巴马汀是延胡索季铵类生物碱的主要成分，关于延胡索生物碱的分离有柱层析、制备高效液相色谱和标准高速逆流色谱法， 文献报道柱层析分离延胡索生物碱，主要是关于延胡索生物碱成分的研究，并且没有进行定量分析，而后两种方法，进样量较小。 本实验采用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱，方法简单，回收率较高；pH-区带精制逆流色谱分离去氢紫堇碱和巴马汀，操作简单，所需时间短，条件温和，回收率高。
获奖情况及鉴定结果
- 1、发表SCI文章一篇： 投稿杂志：Journal of Separation Science. 2、申请发明专利两项： 一种应用pH-区带精制逆流色谱分离去氢紫堇碱的方法（专利号：201010512637.0）； 一种应用硅胶柱层析分离去氢紫堇碱的方法（专利号：201010598262.4）；
作品所处阶段
- 硅胶柱层析在实验室阶段； pH-区带精制逆流色谱已进行了放大实验
技术转让方式
- 专利转让
作品可展示的形式
- 图片
使用说明,技术特点和优势,适应范围,推广前景的技术性说明,市场分析,经济效益预测
- pH-区带精制逆流色谱是根据被分离物的酸碱性和疏水性的不同而进行分离的，它继承了标准高速逆流色谱的高效，对固定相无污染，样品回收率高等优点，同时具有分离容量大、组分被高度浓缩等优点。目前，pH-区带精制逆流色谱已广泛用于肽类及其衍生物、异构体、生物碱等的制备性分离。 去氢紫堇碱是治疗冠心病、心绞痛药物延胡索制剂“可达灵”的有效成分，此外，去氢紫堇碱在治疗溃疡病方面也取得了较好的疗效。另外，动物实验表明，巴马汀可以减缓D-氨基半乳糖/脂多糖引起的暴发性肝功能衰竭。因此，去氢紫堇碱和巴马汀的制备分离对新药研制，对人类的健康均有重要作用。
同类课题研究水平概述
- 去氢紫堇碱和巴马汀是延胡索中季铵类生物碱的主要成分。去氢紫堇碱具有扩张冠状血管，增强心肌耐缺氧能力及保护心肌缺血、坏死等作用，是治疗冠心病、心绞痛药物延胡索制剂“可达灵”的有效成分，此外，去氢紫堇碱在治疗溃疡病方面也取得了较好的疗效。另外，动物实验表明，巴马汀可以减缓D-氨基半乳糖/脂多糖引起的暴发性肝功能衰竭。 在延胡索的季铵类生物碱中，对去氢紫堇碱的研究较多，目前，文献报道去氢紫堇碱的分离有以下三种方法： ⑴ 综合运用各种层析技术：采用大孔吸附树脂、氧化铝和凝胶柱色谱分离去氢紫堇碱，此方法步骤繁琐，分离效率低且死吸附较严重； ⑵ 硅胶柱层析：应用此法主要是对延胡索的生物碱成分进行研究，并没有针对去氢紫堇碱进行专门的研究，并且没有进行定量分析； ⑶ 标准高速逆流色谱：此方法虽然可以得到纯度较高的去氢紫堇碱，但上样量较小。 本实验采用硅胶柱层析对延胡索中的去氢紫堇碱进行分离，此法操作简单，小试实验结果较好，对去氢紫堇碱的制备分离提供了一定的基础。 pH-区带精制逆流色谱是根据被分离物的酸碱性和疏水性的不同而进行分离的，它继承了标准高速逆流色谱高效，对固定相无污染，样品回收率高等优点，同时具有分离容量大、组分被高度浓缩等优点。目前，pH-区带精制逆流色谱已广泛用于肽类及其衍生物、异构体、生物碱等的制备性分离。在通过pH-区带精制逆流色谱分离生物碱方面，此法主要用于叔胺类生物碱的分离，文献报道通过pH-区带精制逆流色谱分离季铵类生物碱的文献只有一篇，本研究首次采用pH-区带精制逆流色谱从延胡索中分离得到去氢紫堇碱和巴马汀两种生物碱，并且进行了中试试验，实验结果较好。
