基本信息
- 项目名称：
- 利用mimic和inhibitor library高通量筛选与脂肪沉积与肌肉肥大相关的关键miRNA
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 通过瞬时转染过表达和抑制miRNA，建立miRNA功能的研究体系。
- 详细介绍：
- miRNA是近年来研究最热的一类对各种生物学功能起调控作用的小RNA，实验在前期已构建在猪脂肪和肌肉组织中特异表达的miRNA文库。本研究选取在鼠和人中对调节脂肪细胞脂质代谢(miR-27a、miR-143) 和肌肉细胞肥大萎缩 (miR-1、miR-206) 有明显功能的miRNAs进行功能验证，实验通过将mimic、inhibitor瞬时转染进猪成熟脂肪和肌肉细胞，测...(查看更多)
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 通过建立猪前脂肪细胞和成肌细胞的培养、诱导、转染体系，完成诱导后成熟脂肪和肌肉细胞的miRNA mimic与inhibitor转染，检测两种细胞的表型指标，分析过表达和低表达miRNA后对脂肪细胞脂质代谢和肌肉细胞肥大萎缩的影响，以此筛选与猪脂肪沉积和肌肉肥大相关的关键miRNA。
科学性、先进性及独特之处
- miRNA是一类重要的非编码小分子RNA，在物种间具有高度的保守性，通过与mRNA的3＇UTR结合，调控基因的转录表达。本实验在前期通过Solexa深度测序建立了microRNAome的前提下，拟采用细胞转染技术对太湖猪肌肉和脂肪细胞中miRNA进行过表达与抑制，检测细胞变化各项相关指标，以期找到在脂肪沉积与肌肉肥大过程中起重要调控功能的miRNAs，为后续活体内的研究奠定基础。
应用价值和现实意义
- 1、建立一套猪脂肪、肌肉细胞的培养，诱导，转染体系； 2、建立一套脂肪和肌肉细胞中miRNA的功能研究方法，为接下来进行的miRNA 文库高通量筛选奠定基础。
学术论文摘要
- 摘要：MicroRNA (miRNA) 是一类约20～25nt的小分子核苷酸，在细胞内调控多种生物学功能。本研究选取在鼠和人中对调节脂肪细胞脂质代谢(miR-27a、miR-143) 和肌肉细胞肥大萎缩 (miR-1、miR-206) 有明显功能的miRNAs进行功能验证，实验通过将mimic、inhibitor瞬时转染进猪成熟脂肪和肌肉细胞，测定转染后脂肪和肌肉细胞的表型指标用...(查看更多)
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- [1] Lynn FC. Meta-regulation: microRNA regulation of glucose and lipid metabolism[J]. Trends in Endocrinology & Metabolism. 2009, 20(9): 452-459. [2] Li M, Xia Y, Gu Y et al. MicroRNAom...(查看更多)
同类课题研究水平概述
- microRNA (miRNA) 作为一类长度约为22nt的非编码小RNA，已被大量实验证实是一种重要的基因转录表达调控因子。miRNA通过种子序列与mRNA的3＇UTR区域部分或完全匹配抑制mRNA翻译或引起mRNA降解来实现其对基因表达的调控。然而，相比于人microRNAome，猪的miRNA研究严重滞后。在Sanger miRBase 16.0版中 ( ，猪目前公...(查看更多)
