主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
利用mimic和inhibitor library高通量筛选与脂肪沉积与肌肉肥大相关的关键miRNA
小类:
生命科学
简介:
通过瞬时转染过表达和抑制miRNA,建立miRNA功能的研究体系。
详细介绍:
miRNA是近年来研究最热的一类对各种生物学功能起调控作用的小RNA,实验在前期已构建在猪脂肪和肌肉组织中特异表达的miRNA文库。本研究选取在鼠和人中对调节脂肪细胞脂质代谢(miR-27a、miR-143) 和肌肉细胞肥大萎缩 (miR-1、miR-206) 有明显功能的miRNAs进行功能验证,实验通过将mimic、inhibitor瞬时转染进猪成熟脂肪和肌肉细胞,测...(查看更多)

作品专业信息

撰写目的和基本思路

通过建立猪前脂肪细胞和成肌细胞的培养、诱导、转染体系,完成诱导后成熟脂肪和肌肉细胞的miRNA mimic与inhibitor转染,检测两种细胞的表型指标,分析过表达和低表达miRNA后对脂肪细胞脂质代谢和肌肉细胞肥大萎缩的影响,以此筛选与猪脂肪沉积和肌肉肥大相关的关键miRNA。

科学性、先进性及独特之处

miRNA是一类重要的非编码小分子RNA,在物种间具有高度的保守性,通过与mRNA的3'UTR结合,调控基因的转录表达。本实验在前期通过Solexa深度测序建立了microRNAome的前提下,拟采用细胞转染技术对太湖猪肌肉和脂肪细胞中miRNA进行过表达与抑制,检测细胞变化各项相关指标,以期找到在脂肪沉积与肌肉肥大过程中起重要调控功能的miRNAs,为后续活体内的研究奠定基础。

应用价值和现实意义

1、建立一套猪脂肪、肌肉细胞的培养,诱导,转染体系; 2、建立一套脂肪和肌肉细胞中miRNA的功能研究方法,为接下来进行的miRNA 文库高通量筛选奠定基础。

学术论文摘要

摘要:MicroRNA (miRNA) 是一类约20~25nt的小分子核苷酸,在细胞内调控多种生物学功能。本研究选取在鼠和人中对调节脂肪细胞脂质代谢(miR-27a、miR-143) 和肌肉细胞肥大萎缩 (miR-1、miR-206) 有明显功能的miRNAs进行功能验证,实验通过将mimic、inhibitor瞬时转染进猪成熟脂肪和肌肉细胞,测定转染后脂肪和肌肉细胞的表型指标用...(查看更多)

获奖情况

鉴定结果

参考文献

[1] Lynn FC. Meta-regulation: microRNA regulation of glucose and lipid metabolism[J]. Trends in Endocrinology & Metabolism. 2009, 20(9): 452-459. [2] Li M, Xia Y, Gu Y et al. MicroRNAom...(查看更多)

同类课题研究水平概述

microRNA (miRNA) 作为一类长度约为22nt的非编码小RNA,已被大量实验证实是一种重要的基因转录表达调控因子。miRNA通过种子序列与mRNA的3'UTR区域部分或完全匹配抑制mRNA翻译或引起mRNA降解来实现其对基因表达的调控。然而,相比于人microRNAome,猪的miRNA研究严重滞后。在Sanger miRBase 16.0版中 ( ,猪目前公...(查看更多)
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