基本信息
- 项目名称：
- 雷公藤内酯醇对AD细胞模型NO释放及iNOS表达的影响
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本研究发现Aβ1－42在激活小胶质细胞介导AD的炎症反应中发挥重要作用；T10可通过抑制小胶质细胞NO释放和iNOS表达拮抗Aβ1-42引起的海马神经元存活率的降低，发挥其神经保护作用，从而为今后临床治疗AD提供实验依据和理论依据。
- 详细介绍：
- AD是一种多发于中老年期的中枢神经系统退变性疾病，其病因与发病机制尚不清楚，目前尚无特效治疗方法和药物。大量研究表明， Aβ沉积激活胶质细胞引发的脑内炎症反应在AD的发生发展中扮演着重要角色。活化的胶质细胞可分泌大量细胞毒性物质参与神经元的退变过程，而抑制胶质细胞活化的药物具有神经保护作用。 T10是从中药雷公藤中提取的小分子单体活性成分，其主要药理活性为抗炎和免疫抑制。T10为小分子脂溶性物质，可以通过血脑屏障，并且脑是T10的代谢富集部位之一，说明T10在中枢神经系统中也可能具有类似的抗炎活性。 本实验利用小胶质细胞活化--AD细胞模型，进一步了解免疫异常和氧化应激在AD发病机制中的作用，通过观察T10对小胶质细胞NO释放（Griess反应）及iNOS表达（Western blot）的影响，探讨雷公藤在AD模型上的抗炎活性及神经保护作用，弄清楚药物的作用途径和靶点，为今后临床治疗阿尔茨海默病提供实验依据和理论依据。 本课题的确立与研究依据充分，研究方法切实可行，结论可靠，具有一定的推广价值。国内尚未查到本课题设计的关于雷公藤内酯醇/单体对AD作用及机制的文献报道。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本实验利用小胶质细胞活化—AD细胞模型，通过观察雷公藤对小胶质细胞NO释放及iNOS表达的影响，探讨雷公藤在AD模型上的抗炎活性及神经保护作用，为今后临床治疗AD提供实验依据和理论依据。
科学性、先进性及独特之处
- 本课题的确立与研究依据充分，研究方法切实可行，结论可靠，国内尚未查到本课题设计的关于雷公藤内酯醇/单体对AD作用及机制的相关文献报道，具有一定的推广价值。
应用价值和现实意义
- 随着人口的老龄化，AD已严重威胁老年人的生命，目前AD尚无特效治疗方法和药物。本课题通过研究雷公藤内酯醇对AD的防治作用及其机制，期望开发出治疗AD的高效低毒药物。
学术论文摘要
- 目的：以Aβ1-42寡聚体为工具药建立AD的炎症模型，观察雷公藤内酯醇对AD的防治作用并初步探讨其作用机制。 方法：用10μM Aβ1-42作用12 h建立小胶质细胞活化——AD炎症细胞模型。用不同浓度的T10 (10-11、10-10、10-9、10-8M)预孵育小胶质细胞12h，然后加入10μM Aβ1-42共孵育12h， Griess反应检测上清NO的含量，Western blot检测iNOS蛋白表达。收获条件培养基，加入海马神经元中，作用24h，MTT法检测神经元存活率，以探讨T10对AD的防治作用及其机制。 结果：Aβ1-42可刺激小胶质细胞释放NO，而10-11～10-8M的T10可抑制小胶质细胞释放NO，减少iNOS表达，从而减轻神经元的损伤。 结论：在体外T10可减少Aβ1-42寡聚体介导的小胶质细胞NO的释放及iNOS表达，该抑制作用可能参与了T10在AD治疗中的神经保护机制。
获奖情况
- 2011年4月在承德医学院举办的大学生科研成果交流会上荣获一等奖
鉴定结果
- 无
参考文献
- 1.Zhou HF, Liu XY, Niu DB, et al. Triptolide protects dopaminergic neurons from inflammation -mediated damage induced by lipopolysaccharide intranigral injection. Neurobiol Dis. 2005;18: 441-449. 2.Zhou HF, Niu DB, Xue B, et al. Triptolide inhibits TNF-alpha, IL-1 beta and NO production in primary microglial cultures. Neuroreport. 2003;14: 1091-1095. 3.Bamberger ME, Harris ME, McDonald DR, Husemann J and Landreth GE. A cell surface receptor complex for fibrillar beta-amyloid mediates microglial activation. J Neurosci. 2003;23: 2665-2674. 4.Liu B，Hong JS. Role of microglia in inflammation-mediated neurodegenerative diseases: mechanisms and strategies for therapeutic intervention. J Pharmacol Exp Ther. 2003;304: 1-7. 5.薛冰，等.雷公藤单体T10对过氧化氢所致PC12细胞损伤的保护作用及其机制的研究.中华神经医学杂志，2006，5（12）：1194-8
同类课题研究水平概述
- 随着世界人口的老龄化，AD发病率逐年上升，严重危害中老年人的身心健康。。在发达国家，AD已成为继心脏病、癌症和中风之后人类的第四位死因。在我国65岁以上人群中，每100人中有4.8人患AD，因而攻克AD、提高老年人的生命质量，是当今生物医学研究领域的重大课题之一。迄今为止，AD尚无特效治疗方法和药物。目前治疗AD的主要手段是使用乙酰胆碱酯酶抑制剂如毒扁豆碱，依色林等，这些制剂可以减少乙酰胆碱的降解，增加突触乙酰胆碱的含量。但从总体上看，这些药物对病情的改善程度都不是很大，其主要原因可能与AD病患者大脑进行性退化引起其递质系统的广泛改变，以及药物作用时间短暂及其严重的外周副作用有关。神经营养因子对于维持神经元的存活、阻止神经元的变性和促进受损神经元的修复和再生均有至关重要的作用，但由于神经营养因子都是大分子蛋白质，不易通过血脑屏障，严重影响了其临床应用。因此，寻找一种可以通过血脑屏障的小分子神经营养物质，对AD的治疗具有重要意义。 雷公藤主要活性为抗炎和免疫抑制，目前用于系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫炎症性疾病的治疗。近年来研究表明，在体内外帕金森病模型中雷公藤对多巴胺神经元具有神经保护作用，作用机制与其抑制脑内小胶质细胞异常活化的抗炎活性相关。雷公藤在AD模型上是否同样具有抗炎活性及神经保护作用，未见报道。
