基本信息
- 项目名称：
- 黄芩苷磷脂复合物——纳米脂质体的制备及特性研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 本课题利用单因素实验方法制备黄芩苷磷脂复合物，改善黄芩苷的亲脂性能；在此基础上，采用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体，增加了黄芩苷在水和有机溶剂中的溶解度。同时，实验对黄芩苷磷脂复合物、纳米脂质体的特性进行了研究。
- 详细介绍：
- 黄芩苷具有抗炎、抗病毒、扩张血管、调节免疫系统等药理作用，但存在脂溶性和水溶性较差、稳定性不佳等问题，限制了其在临床上的广泛应用。 本实验①首先通过单因素实验法确定按照在室温下以四氢呋喃为反应溶剂，黄芩苷和大豆卵磷脂按照1:3.5投料，反应系统中黄芩苷浓度为2.5mg/ml，反应时间为5h的制备工艺为黄芩苷磷脂复合物的最佳制备工艺；对研制的黄芩苷磷脂复合物的水分散性质、溶解性能及油-水分配系数进行研究。②采用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体，利用葡聚糖凝胶柱对脂质体和游离药物进行分离，以粒径、外观、颜色、氧化指数为指标，考察黄芩苷纳米脂质体的理化性质；分别绘制黄芩苷纳米脂质体和黄芩苷溶液的体外释放曲线比较其体外释药过程，并用零级、一级及Higuchi方程进行拟合，考察相关系数，通过紫外分光光度法测定纳米脂质体中黄芩苷的包封率。 实验研究表明：①制备的黄芩苷磷脂复合物在水中分散呈圆整囊泡球型，颗粒透明，大小9μm；黄芩苷磷脂复合物在水及正辛醇中的溶解性，分别是黄芩苷的3.06倍和22.41倍；在不同pH水-正辛醇系统中，黄芩苷磷脂复合物的表观油-水分配系数与黄芩苷相比也有较大的差异。②制备的黄芩苷纳米脂质体均匀稳定，放置24h无沉淀产生；平均包封率为62.76％；葡聚糖凝胶柱色谱法的方法回收率为80.04％，柱回收率为90.38％；光学显微镜下观察所得黄芩苷纳米脂质体形态圆整，粒径均匀；电镜扫描得到黄芩苷纳米脂质体的粒径为600-700nm；VE可以防止磷脂的氧化；在4℃存放30天的黄芩苷纳米脂质体基本无沉淀产生，外观均匀，在常温下放置的黄芩苷纳米脂质体出现颗粒状沉淀，超声后可恢复原状；脂质体的含药量为87.32％；体外释放符合一级动力学方程：log(UQ)=0.0245t-3.748，r2=0.9145。 通过本实验制备的黄芩苷磷脂复合物在水及正辛醇中的溶解性能比黄芩苷及物理混合物有明显改善，改善了黄芩苷在有机溶剂中的溶解特性；在此基础上制备的黄芩苷纳米脂质体质量稳定，载药材料可被生物降解吸收，无毒性，并有一定的缓释作用，提高黄芩苷的生物利用度，为其新剂型的开发和在临床的广泛应用提供了条件。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 黄芩苷药理作用明确，在临床上应用广泛，但其在水和有机溶剂中溶解度低，限制其临床应用；通过制备黄芩苷磷脂复合物——纳米脂质体，以期改善药物脂溶性、增加药物靶向性、提高药物生物利用度。因此本实验首先采用单因素实验法确定黄芩苷磷脂复合物的最佳制备工艺，改善黄芩苷的亲脂性能；进而采用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体，提高黄芩苷的生物利用度，降低毒副作用，增强靶向性，为开发黄芩苷新剂型提供理论依据和技术支持。
科学性、先进性及独特之处
- 通过研究不同因素对黄芩苷和磷脂结合率的影响，确定黄芩苷磷脂复合物最佳制备工艺，在此基础上，采用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体。本研究采用简便、易行、可控的实验方法制备黄芩苷磷脂复合物——纳米脂质体，经对其进行质量评价，均得到理想实验结果，解决了黄芩苷口服难吸收的问题，提高其靶向性及生物利用度。本研究立论正确，论述充分，结论严谨；整体实验设计合理，采用技术方法先进，分析处理科学，论文结果有应用价值。
应用价值和现实意义
- 黄芩苷具有抑菌抗炎、抗病毒、促黑素生成和抗肿瘤等作用，降低脑血管阻力，增加脑血流量，减轻组织的缺血再灌注损伤，具有明显的神经细胞保护作用。但黄芩苷溶解性不佳，不易透过血脑屏障，口服难吸收，限制了其在临床上广泛应用。通过制备黄芩苷磷脂复合物——纳米脂质体，使其易透过血脑屏障，增加其与脑部组织的亲和力，增强脑部靶向性；同时利用纳米脂质体的靶向缓控释作用，可在一定程度上提高药物疗效，降低毒副作用。
学术论文摘要
- 黄芩苷药理作用明确，但存在溶解性较差限制其在临床上广泛应用。 本实验首先通过单因素实验法确定在室温下以四氢呋喃为反应溶剂，黄芩苷和大豆卵磷脂按照1:3.5投料，反应系统黄芩苷浓度2.5mg/ml，反应时间5h为黄芩苷磷脂复合物最佳制备工艺；对该复合物理化性质进行研究。采用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体，并对其性质进行评价。 实验研究表明：黄芩苷磷脂复合物在水中分散呈圆整囊泡球型，颗粒透明，大小9μm；在水及正辛醇中溶解性，分别是黄芩苷的3.06倍和22.41倍。黄芩苷纳米脂质体均匀稳定，在4℃存放30天纳米脂质体基本无沉淀产生；平均包封率62.76％；葡聚糖凝胶柱色谱法方法回收率80.04％，柱回收率90.38％；光学显微镜观察脂质体形态圆整，粒径均匀；电镜扫描粒径600-700nm；VE防止磷脂氧化；含药量87.32％；体外释放符合一级动力学方程：log(UQ)=0.0245t-3.748，r2=0.9145。 本实验制备的黄芩苷磷脂复合物明显改善黄芩苷亲脂性；黄芩苷纳米脂质体质量稳定，载药材料可生物降解，无毒，有缓释作用，提高黄芩苷生物利用度。
获奖情况
- 课题资助： ①泰山医学院大学生科研基金项目（201001042）:黄芩苷纳米粒的制备及其质量评价（主持） ②山东省中医药科技发展计划项目（2009-181）:黄芩苷-固体脂质纳米载体眼用原位凝胶研究（参与） 发表文章情况： 王川，赵雪梅，郝吉福，李静．新技术和新剂型改善黄芩苷生物利用度的研究进展[J]．《中成药》，已录用（附录用证明）。
鉴定结果
- 本课题通过制备黄芩苷磷脂复合物—纳米脂质体，研究新技术和新剂型在改善黄芩苷溶解度方面的应用。研究部分成果已在国家核心期刊发表，结果表明利用新技术新剂型可以明显改善黄芩苷溶解性能，提高黄芩苷生物利用度。
参考文献
- [1] 孙俊,陈志鹏,蔡宝昌.银杏叶提取物磷脂复合物的制备[J].中华中医药学刊,2009,27(12):2671-2673. [2] 熊阳,盛卫国,杜佳琦,等.山楂叶总黄酮磷脂复合物的研究[J].中草药,2008,39(3):353-356. [3] 刘嘉,刘汉清,李俊松,等.丹酚酸B磷脂复合物制备工艺研究[J].医药导报,2009,28(9):1189-1191. [4] 刘朋飞,孙业欣,彭 伟,等.脱氧氟尿苷脂质体的制备[J].中国生物制品学杂志,2009,22(6):596-598,601. [5] 周荣丽.碘海醇脂质体的制备及体内外释药性研究[D].山东大学,2007. [6] 朱莉.5-氟尿苷棕榈酸酯脂质体的制备及其细胞毒性研究[D].重庆医科大学,2008. [7] 朱林,王璐璐,倪坤仪,等.甲氨蝶呤磁靶向脂质体的制备及初步评价[J].中国药学杂志,2006,41(17):1324-1327. [8] 张岩.盐酸青藤碱柔性脂质体的制备及评价[D].沈阳药科大学,2008. [9] 邓英杰.脂质体技术[M].北京:人民卫生出版社,2007. [10] 李卉芳,刘明星,刘清飞,等.表面修饰的灯盏花素聚乳酸纳米粒的制备和大鼠体内药动学[J].中国新药杂志,2007,16(8):614-618.
同类课题研究水平概述
- 黄芩苷具有抑菌抗炎、抗病毒、抗氧化、解热、促黑素生成和抗肿瘤等药理作用，用于治疗中风和瘫痪，临床应用十分广泛。但黄芩苷的水溶性和脂溶性都较差，口服难吸收，限制了其在临床上更广泛的应用。 把溶解性差的天然活性成分制成磷脂复合物，可增加天然活性成分亲脂性和改善渗透性。脂质体作为一种新型给药系统，能增加天然活性成分靶向性，提高其生物利用度；制备的天然活性成分脂质体具有质量稳定，含量均匀，载药量高等优点。纳米技术在药物纳米载体方面已有大量应用，具有靶向性高，可降解，无毒、缓释的特点。本课题通过制备黄芩苷纳米脂质体，提高黄芩苷生物利用度，减小毒副作用，增强其靶向性，拓宽在临床上的发展空间。 本课题首先采用单因素实验法确定黄芩苷磷脂复合物最佳制备工艺：在室温下以四氢呋喃为反应溶剂，黄芩苷和大豆卵磷脂按照1:3.5投料，反应系统中黄芩苷浓度为2.5mg/ml，反应时间为5h。该复合物在水中分散均匀，颗粒透明，在水及正辛醇中的溶解性，分别是黄芩苷的3.06倍和22.41倍，显著改善黄芩苷亲脂性，药物结合率高。进而应用逆向蒸发法制备黄芩苷纳米脂质体，得到的纳米脂质体均匀稳定，放置24h无沉淀产生；平均包封率62.76％；在常温下放置的黄芩苷纳米脂质体出现颗粒状沉淀，超声后可恢复原状；含药量为87.32％；体外释放符合一级动力学方程：log(UQ)=0.0245t-3.748，r2=0.9145。黄芩苷纳米脂质体质量稳定，含量均匀，载药量高，增加了黄芩苷在水和有机溶剂中的溶解度，解决了黄芩苷口服难吸收的问题，提高了黄芩苷的靶向性和生物利用度。 在上述工作基础上，目前正在进行黄芩苷固体脂质纳米粒眼用原位凝胶新剂型的研究：采用乳化溶剂挥发法确定黄芩苷固体脂质纳米粒的最佳制备工艺，利用纳米粒增溶技术制备黄芩苷固体脂质纳米粒，将制得的黄芩苷纳米粒用于制备眼用原位凝胶。这种新剂型可减少药物流失，延长药物在眼部滞留时间，增强角膜黏附性和渗透性，不良反应少，改善病人的顺应性，并具有良好的缓、控释药性能。 研究多种增溶技术和剂型在改善黄芩苷在水和有机溶剂中溶解度方面的作用，为拓宽黄芩苷在临床上的应用提供理论依据和技术支持。本课题关于黄芩苷增溶、提高靶向性和生物利用度、制备新剂型的研究在国内外处于领先。
