基本信息
- 项目名称：
- 对位红抗原的合成与多克隆抗体的制备及其在食品残留中的检测
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 现今社会食品安全是大家十分关注的，一些不法商贩为了获得利益滥用对位红染色剂非法添加到食物之中。而这些对位红物质对人身体又十分巨大的危害，并且具有致癌作用。所以食品中对位红的检测是十分必要和紧迫的。
- 详细介绍：
- 通过抗原合成、动物免疫、获得具有高特异性的多克隆抗体，通过对抗体的特异性分析，为研制出对位红试剂盒打好基础。对于食品中对位红的有效检测和监督管理，提升食品质量安全，保障国民身体健康，维护社会稳定。为我国食品安全，提供简易，有效，低耗，低成本的检测方法。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 对位红属于人工合成的偶氮类染料，其具有较强毒性的致癌物，因此应尽可能避免摄入这种物质。虽然国家已明令禁止在食品中添加对位红。但某些不法分子仍然使用这种致癌染色物添加到食品中谋取利益。因此，为了保证食品安全，建立快速方便的检测对位红免疫方法极为重要。
科学性、先进性及独特之处
- 本研究采用混合酸酐法将对位红与牛血清白蛋白偶联制备免疫原，用合成的免疫原免疫新西兰大白兔，制备出针对对位红的多克隆抗体，并对其特性进行分析，进一步建立免疫分析法检测食品中对位红残留。
应用价值和现实意义
- 由于对位红具有致癌性，我国禁止将对位红作为食品添加剂用于食品生产。但某些不法分子将其添加到食品中，提高食品感官度。因此，建立快速方便的检测对位红免疫方法极为重要。
学术论文摘要
- 对位红属于人工合成的偶氮类染料，结构与苏丹类色素类似，具有致癌致突变等作用，但因其具有颜色鲜亮，不易褪色等特点，不法分子将其添加到食品中，提高食品感官度，危害消费者健康。因此，建立快速的检测对位红免疫方法极为重要。本研究采用混合酸酐法将对位红半抗原与阳离子化牛血清蛋白(cBSA)偶联合成完全抗原，通过紫外分析偶联物，完全抗原免疫动物，制备出抗对位红多克隆抗体，通过间接竞争ELISA法对抗体特性分析，并建立对位红酶联免疫分析条件。结果完全抗原对位红与蛋白偶联比分别为14:1，对位红多克隆抗体效价达到1×106，对位红抗体与苏丹红I 的交叉反应率为97.8%，与其它苏丹红类染料的交叉反应率都低，应用抗体检测对位红在0.1ng/mL~1000ng/mL线性范围最低检测限为7.43 ng/mL。建立的间接竞争ELISA法检测对位红条件包被时间为2h，封闭时间1h，一抗竞争时间是45min，二抗反应时间为45min，底物作用时间为15min；四种样品中对位红平均回收率为102.65%。结果表明制备的抗对位红多抗特异性强，免疫分析准确度和精密度均比较高，可用于检测食品中的对位红残留。
获奖情况
- 论文《对位红抗原合成和多克隆抗体制备》已经投在《中国农学通报》
鉴定结果
- 无
参考文献
- 葛宝坤,陈其勇,赵孔祥,高健会,王云凤,刘旸,高效液相色谱法测定蛋黄中苏丹I～IV及对位红,中国国境卫生检疫杂志,2007,30(3) 刘国艳，柴春彦，葛宇，孙耀辉,食品中对位红等禁用偶氮染料检测方法研究进展,食品科学,2007,28(11)
同类课题研究水平概述
- 国外实验室偶氮染料的检测，则常采用液相、气相色谱法或与质谱联用进行定性、定量；这些方法具有检测精度高、灵敏、准确、稳定等一系列优点，但设备及检测费用昂贵、操作复杂、分析时间长，不能实现现场检测，限制了其推广和应用，也给对位红和甲苯胺红的快速检测和监管带来困难。国内仍未有针对对位红的检测方法标准，对偶氮染料日常检测主要参考苏丹红的方法标准（GB/T19681—2005），采用溶剂萃取，液相色谱测定。目前国内检测机构用来检测对位红的方法主要是仪器法，如高效液相色谱法（HPLC），液相色谱法（LC），液相色谱-质谱联用法（LC-MS/MS），气相色谱法等仪器方法，另外免疫测定法，电化学法，毛细管电泳法，层析技术等方法也逐渐应用于对位红和苏丹红类色素的检测中。
