基本信息
- 项目名称：
- 菲律宾蛤仔糖蛋白提取及体外抗肿瘤活性研究
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 以菲律宾蛤仔肉为研究对象，提取某糖蛋白，将该糖蛋白作用于前列腺癌细胞DU-145进行体外药物敏感性实验, 结果表明菲律宾蛤仔具有潜在的抗肿瘤作用。
- 详细介绍：
- 以菲律宾蛤仔肉为研究对象，水提醇沉，Sevag法除蛋白，DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析柱分离纯化，Sephadex G-25凝胶柱除盐，得到1种白色组分，红外显示该组分具有糖蛋白的一般吸收特征。将该糖蛋白作用于前列腺癌细胞DU-145进行体外药物敏感性实验, 结果显示, 0.1 mol/L 氯化钠溶液的洗脱峰组分对DU-145细胞具有明显增殖抑制作用, 最适作用浓度约为25 mg/mL，表明菲律宾蛤仔具有潜在的抗肿瘤作用。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 目的：通过对菲律宾蛤仔提取物糖蛋白对前列腺癌细胞DU-145进行体外药物敏感性实验，研究菲律宾蛤仔的潜在的抗肿瘤作用。 基本思路：先从菲律宾蛤仔中提取糖蛋白，再通过离子交换层析柱，进行阶段洗脱，用紫外检测蛋白峰，同时检测糖峰，收集峰值洗脱液，用Sephadex G-25凝胶柱除盐，冷冻干燥。再考察纯化后的电泳行为。采用苯酚-硫酸法、紫外和红外光谱对糖蛋白理化性质分析，最后进行活性测定。
科学性、先进性及独特之处
- 科学性、先进性：近年来，随着海洋药物的深入研究发现了海洋软体动物体内常存在着许多具有药用价值的特殊生理活性物质。该实验正是选择这种充满研究潜力的材料极具科学性和先进性。 独特之处：该实验并非采用一般实验室常用的透析方法来脱盐，而是选择凝胶过滤层析，该方法可通过紫外和电导检测器监控整个层析过程、产品的纯度和回收率,又可连续自动进样和收集样品,自动化程度高,容易放大，操作简便易行,脱盐效果可靠。
应用价值和现实意义
- 目前我国肿瘤的发病率及死亡率仅次于心血管疾病，越来越受到医学界的重视。最新研究表明，菲律宾蛤仔提取物具有抗肿瘤、改善症状、延长病人生命、提高免疫力、抗动脉粥样硬化等作用。PCa在男性泌尿、生殖系统恶性肿瘤中发病率跃居第三位。由于PCa癌症患者长期化疗损害重要脏器，且会产生肿瘤耐药性，影响化疗效果，在预防和治疗上还没有更好的方法和手段。因此，目前关于抗前列腺癌药物制剂的开发和应用成为了研究热点。
学术论文摘要
- 以菲律宾蛤仔肉为研究对象，水提醇沉，Sevag法除蛋白，DEAE-Sepharose FF阴离子交换层析柱分离纯化，Sephadex G-25凝胶柱除盐，得到1种白色组分，红外显示该组分具有糖蛋白的一般吸收特征。将该糖蛋白作用于前列腺癌细胞DU-145进行体外药物敏感性实验, 结果显示, 0.1 mol/L 氯化钠溶液的洗脱峰组分对DU-145细胞具有明显增殖抑制作用, 最适作用浓度约为25 mg/mL，表明菲律宾蛤仔具有潜在的抗肿瘤作用。
获奖情况
- 还未发表
鉴定结果
- 无
参考文献
- [1] 范秀萍,吴红棉,王娅楠,等. 菲律宾蛤仔糖胺聚糖的免疫活性研究[J]. 食品科学, 2008, 29(4):370-372. [2] KEISUKE G T, Takuo K, Kiyokun M. Purification and antibacterial characterization of a novel isoform of the Manila clam lectin (MCL-4) from the plasma of the Manila clam, Ruditapes philippinarum[J]. Comp Biochem Physiol, 2008, 150:45–52. [3] 张 莉,刘万顺,韩宝芹,等. 菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)蛋白聚糖的分离提取及其抗肿瘤活性的初步研究[J]. 海洋与湖沼, 2007,38(1): 62-68. [4] 肖 莹. 糖蛋白生物活性研究综述[J]. 现代农业科学, 2009,16(4):31-32. [5] 郭 慧,邓文星,张 映. 糖蛋白的研究进展[J]. 生物技术通报,2009, 3:16-19. [6] 张 柏,吴梧桐. 抗肿瘤文蛤糖肽(MGP0405) 的分离纯化及性质研究[J]. 中国天然药物, 2006, 4(3):230-233. [7] 顾谦群,方玉春,辛现良,等. 栉孔扇贝糖蛋白的肿瘤抑制活性和对免疫功能的影响[J]. 营养学报,2001, 23(3) :200-202. [8] 韩雅莉,谢 昆. 土鳖虫糖蛋白的提取及抗肿瘤活性初步研究[J]. 汕头大学学报：自然科学版, 2006, 21(4): 46-50. [9] 徐明生,曾婷婷,蒋 艳,等. 河蚬免疫活性糖蛋白分离及结构初步分析[J]. 食品科学,2008, 29(11) : 157-160.
同类课题研究水平概述
- 近年来，随着海洋药物的深入研究发现了许多结构新颖、生理活性特殊的物质。特别是海洋软体动物，因其特殊的生活环境和代谢方式体内常存在着许多具有药用价值的特殊生理活性物质。美国的Luesch等人自海洋藻青菌 Symploca sp.和海兔Dolabella auricularia中分离得到了抗肿VP642，具有很强的抗肿瘤活性。从海洋微生物 L .majuscula中分离得到的生物活性多肽已被证明具有HIV-1整合酶的酶抑制剂功能。此外，从日本的蒂壳海绵属海绵动物中分离到的杂环多肽，对鼠白血病细胞具有强细胞毒性。海洋生物抗肿瘤多肽还具有活性高、稳定性好等特点。据不完全统计，约10%的海洋动物提取的化合物具有抗肿瘤活性，3.5%的海洋植物提取物具有抗肿瘤和细胞毒性。 目前虽然已经证明多糖在体内和体外均可以显著促进细胞免疫和体液免疫以及明显抑制肿瘤细胞的生长和转移,但是一些关键问题如多糖为何会选择性抑制肿瘤细胞生长而不影响正常细胞生长及其抗肿瘤机制等仍未完全研究清楚。此外 ,如何解决多糖类药物血液清除速度快、 口服给药利用度差的问题 ,以及建立合理、公认的评价模型来证明多糖类药物的安全性和有效性 ,这些都是今后的研究方向。因此 ,今后的工作不应该局限于资源的挖掘和粗提物的生理活性实验方面 ,而应该在以往研究较少、 挑战性较强的糖组学构效关系等方面有所突破 ,为日后糖库的建立及糖芯片的研发提供坚实的基础。 最新研究表明，菲律宾蛤仔提取物具有抗肿瘤、改善症状、延长病人生命、提高免疫力、抗动脉粥样硬化等作用。糖蛋白广泛存在于生物体内，是蛋白质和糖类的共价复合物，具有很多重要功能。它既是激素、凝集素、酶、毒素、病毒和细菌等的识别点，也是细胞表面抗原、糖分化抗原和癌发育抗原，在细胞信号转导过程中具有十分重要的作用，目前从生物体内提取糖蛋白并测定其抗肿瘤活性的文献已有大量报道。本研究经离子交换和凝胶层析等方法分离纯化出具有较强活性的糖蛋白，并对其化学结构及体外对人肿瘤细胞的增殖抑制活性进行了初步研究。
