基本信息
- 项目名称：
- 血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）匀相法体外诊断试剂
- 来源：
- 第十一届“挑战杯”国赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 科技发明制作A类
- 简介：
- 本作品从研究表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理出发，建立了清除法测定血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）方法学，最后根据建立的方法学研发相应的测定试剂并进行产业化推广，以解决目前国内在开展LDL-C检测时试剂大量依赖进口的现状。这对于提高临床实验室的检测效率、相关疾病的确诊率、实现诊断试剂的国产化，具有重要意义。本作品的实施得到了浙江省科技厅新苗人才计划、浙江省大学生科技成果推广项目、某市首届大学生创业大赛（冠军）创业扶植基金共4.6万元支持。
- 详细介绍：
- 低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）是血浆中胆固醇含量最多的一种脂蛋白，颗粒较小，其胆固醇的含量(包括胆固醇酯和游离胆固醇)在一半以上。LDL-C的主要生理功能是将肝脏内的胆固醇经血液转运到各个组织进行利用，促进细胞内胆固醇的大量蓄积。动脉粥样硬化（AS）在斑块中沉淀的脂质主要是低密度脂蛋白（LDL-C），各类脂质中，LDL-C被认为是主要的致病因素，因此在AS脂类危险因素判别中，测定LDL-C有重要临床意义。 “血清低密度脂蛋白匀相法检测试剂”，是一种运用匀相法检测人体血清中LDL-C含量的体外诊断试剂，使用该试剂对人体血清中的LDL-C进行测定时，不需要对血清样本进行预处理，即不需要将LDL-C从血清中分离出来，也不需要将LDL-C与血液的其它成分包括高密度脂蛋白HDL、极低密度脂蛋白VLDL、乳糜微粒CM等作离心沉淀分离处理，就可以直接进入分析系统进行定量检测，从而达到匀相、直接检测的目的。由于该诊断法操作简捷，而且血清样本用量微量（3微升），完全适用于自动化检测的需要，与经典的Friedewald公式法相关性好，因而为国内外所瞩目，被称为最新一代的LDL-C临床检测法。实现这一试剂国产化有利于在这一领域与国际接轨，技术上达到国际先进水平，有利于提高检测和医疗水平，保障人民健康。
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作品专业信息
设计、发明的目的和基本思路、创新点、技术关键和主要技术指标
- 本项目从研究表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理出发，建立了清除法测定血清低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）方法学，最后根据建立的方法学研发相应的测定试剂，以解决目前国内在开展LDL-C检测时试剂大量依赖进口的现状。这对于提高临床实验室的检测效率、相关疾病的确诊率、实现诊断试剂的国产化，具有重要意义。 创新点及关键技术：应用非离子型混合表面活性剂的第二代清除法技术的血清LDL-C测定方法及试剂,改变国内测定LDL-C时使用磷钨酸根及Mg2+的第一代清除技术所存在的测定结果准确性差、检测废液易堵塞生化分析仪管道的缺点。 其主要技术指标有： 1、检测灵敏度高，使用微量（3微升）血清样本即可进行准确测定； 2、特异性好，加入抗坏血酸≤284mmol/L、血红蛋白≤5g/L、胆红素≤340μmol/L无明显干扰； 3、测定准确度高，达到95%～99%； 4、测定线性范围宽，为0.01～12.9mmol/L； 5、产品在2℃～8℃保存可稳定一年以上。
科学性、先进性
- 本试剂在选用混合表面活性剂、稳定剂及显色剂体系组合方面取得了突破，一方面提高了试剂的特异性和抗干扰性，从而拓宽了试剂的检测线性范围，达到0.01-12.9mmol/L的水平；另一方面提高了试剂的稳定性，使之可以在2℃-8℃下稳定保存一年以上；同时又大大降低了试剂的成本。由此三点，大大拓宽了试剂的临床应用范围，取得了对进口同类试剂的市场竞争优势。 国内同类LDL-C检测试剂的研究水平,尚停留在采用磷钨酸根及Mg2+组合的第一代清除技术，与本技术相比，测定时存在方法特异性差、方法线性范围窄、测定试剂不稳定的缺点[1]，尚未达到产业化水平。 参考文献： 1、张世俊, 蒋知新, 张金树,等. 血清低密度脂蛋白胆固醇匀相测定法试剂的研制. 中华检验医学杂志, 2000, 23(5): 276-299.
获奖情况及鉴定结果
- 1、2009年某市首届大学生创业大赛作品冠军（LDL-C诊断试剂为获奖作品“普世生物科技有限公司”主导产品）。 2、2009年2月和3月分别经福鼎市医院检验科和福州市第六医院检验科临床鉴定，认为该测定试剂准确性好，灵敏度高、测定结果与临床相符，具有良好的临床应用推广价值。
作品所处阶段
- 中试阶段。
技术转让方式
- 本项目尚未进行技术转让，但已经与上海沪旦生物科技有限公司达成产业化合作意向。
作品可展示的形式
- 图片、录像、样品
使用说明,技术特点和优势,适应范围,推广前景的技术性说明,市场分析,经济效益预测
- 技术特点：作品采用最新的表面活性剂型清除法检测原理，试剂质量达到日本第一化学LDL-C检测试剂水平，使用时特异性好，准确性高，并且无浊度干扰和堵塞自动生化分析仪管道风险，技术明显优于目前国内部分厂家推出的聚阴离子型LDL-C检测试剂。 技术优势：具有自主知识产权，试剂成本和销售价格仅为进口同类试剂销售价格的25%-40%，产品具有很高的性价比。 适用范围：体外诊断血清LDL-C含量。 推广前景：目前临床使用的LDL-C匀相法检测试剂大量依赖进口，本作品的发明可实现LDL-C诊断试剂的国产化，而其性价比又明显由于进口试剂，因此有很好的实际推广应用前景。
同类课题研究水平概述
- 临床上测定LDL-C的方法有超速离心沉淀法、Friedewald公式法、各种电泳法和美国NCEP推荐的参考方法即Beta-quantification法,简称βQ法, 还有Mcnamara等报道的DirectLDL法, 沉淀法和电泳法麻烦、费时, 计算法受很多因素影响, βQ法准确度欠佳, DirectLDL法尽管称为直接测定法，但仍需聚苯乙烯胶乳免疫分离预处理,属于不均一相测定法。国外目前发展的匀相测定法，标本用量少，不需沉淀处理，可用于自动生化分析仪测定，在准确度和精密度方面都可达到NCEP的分析目标。目前国外已有多家体外诊断试剂公司开发了血清LDL-C匀相法检测试剂并应用于临床，国内这方面的研究相对滞后，已开展了使用聚阴离子为抑制剂的选择性抑制法方法学研究，并进行了相应的检测试剂盒研发。以聚阴离子为抑制剂的匀相测定法在测试第一步虽然能对LDL-C起到良好的抑制作用，但其抑制效果与反应时间非常相关，抑制时间大于5-8分钟后抑制效果明显下降，测定干扰增加；此外在测定过程中不可避免地形成由聚阴离子和LDL-C脂蛋白组分形成的絮状复合物，此复合物在5-8分钟抑制期内不参与匀相体系中酶与胆固醇的反应，但随标本中LDL-C组分浓度的不同产生不同浊度，尤其是高脂血症标本的浊度还会干扰LDL-C酶反应，导致测量结果偏低；此外，当测试完毕，检测废液被排出自动生化分析仪时，聚阴离子中存在的高浓度镁离子还有可能与分析仪管道中其他的碱性废液形成氢氧化镁沉淀而引起管道堵塞，容易对自动分析仪造成不良影响。 本作品是在浙江省科技厅新苗人才计划项目资助下完成的（表面活性剂与不同类型脂蛋白胆固醇的相互作用机理及应用研究（2007G*******）. 经费：0.6万. ）。该试剂采用一组与LDL-C有选择性亲和能力的表面活性剂实现清除法测定LDL-C，产品质量和日本第一化学同类产品质量一致，具有自主知识产权，试剂成本和销售价格仅为进口同类试剂销售价格的25%-40%，产品具有很高的性价比。该项目的推广应用和产业化得到了浙江省大学生科技成果推广项目（2008年, 1.0万）和某市首届大学生创业大赛创业扶植基金(2009年,3.0万)的支持,项目推广应用后将会带来很好的社会效益和经济效益。
