主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统
小类:
生命科学
简介:
我们发明的蛋白表达纯化系统是一种基于荧光蛋白的“夹心法”标签表达纯化系统。本发明的蛋白表达纯化系统,是将目的蛋白的两端,在N端连接一个新型荧光蛋白sGFP标签,在C端连接上一个组氨酸His短肽,并加有多核苷酸酶切位点,蛋白全长融合表达。同时可以根据需要在目的蛋白与标签之间加入蛋白酶切位点。该系统的目的蛋白表达效率能够得到改进,提高目的蛋白产率,全长蛋白在可见光下为绿色,可...(查看更多)
详细介绍:
荧光蛋白有许多优良特性,如非外源因子依赖发光,无种属依赖性,非常高的稳定性,对生物体无毒性,可传代进行遗传分析,因而荧光蛋白在遗传学,发育生物学,神经生物学等学科都有着非常广泛的应用。因此针对现有的蛋白纯化体系中使用的标签无法实时指示目标蛋白在(大肠杆菌菌株中)表达、纯化中的情况,蛋白纯化实验周期长,可控性差的问题,我们由荧光蛋白的一系列良好特性得到启发,利用新型荧光蛋白...(查看更多)

作品图片

  • 基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统
  • 基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统
  • 基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统
  • 基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统
  • 基于荧光蛋白标签的“夹心法”重组蛋白生产分离纯化系统

作品专业信息

设计、发明的目的和基本思路、创新点、技术关键和主要技术指标

一、设计发明目的和基本思路: 针对现有的蛋白纯化体系中使用的标签无法实时指示目标蛋白在表达、纯化中的情况,同时为了避免蛋白纯化实验周期长,可控性差的问题,我们由荧光蛋白的一系列良好特性得到启发,利用新型超级折叠绿色荧光蛋白荧光蛋白构建保有传统接头优点的可视化的生物反应器,将所构建的具有优良特性的蛋白纯化体系用于生命科学相关研究和应用。而在教学应用方面,我们的系统也可应用在...(查看更多)

科学性、先进性

1.过程可视可控。首次尝试将荧光蛋白作为增溶接头使用并成功应用,在保持传统增溶接头优点的同时利用荧光蛋白良好的非外源因子依赖发光特性使实验的过程变得可视可控,提前知道蛋白表达的情况怎么样,是否断裂表达严重,从柱上分步洗脱的时候在哪几管里,我们不仅能提高我们的实验效率,加速我们的实验进度,还能从经济上节约实验成本。 2.综合性能优异。相比其他种类的荧光蛋白,07年报道的新型荧光蛋白...(查看更多)

获奖情况及鉴定结果

一、2009年5月中国遗传学会副理事长余龙教授出具推荐信一封。 二、2009年5月国家教育部生物科学与工程教学指导委员会副主任、生物科学专业分委员会主任、复旦大学生命科学学院原教学副院长乔守怡教授对本项目给予了极高评价,并出具了本项目适合在教学中推广的应用证明。

作品所处阶段

中试阶段

技术转让方式

作品可展示的形式

实物、产品,现场演示,录像

使用说明,技术特点和优势,适应范围,推广前景的技术性说明,市场分析,经济效益预测

一、技术特点和优势 荧光蛋白标签亮度高,稳定,可视化,性质稳定,助折叠,提高目的蛋白溶解性等特点;双标签“夹心法”设计指示蛋白的断裂表达情况;His标签长度根据纯化条件可任意调整;便于目的蛋白替换,操作便捷;实时监控,节省时间和经费;可规模化、产业化,成批操作,带来可观经济效益。 二、适用范围 广泛适用于重组蛋白的表达,分离和纯化,可以用于生物医药,工业生产和科学...(查看更多)

同类课题研究水平概述

随着蛋白质-组学研究的深入,将待研究蛋白与增溶标签进行融合表达和纯化已经成为常规手段。而由于荧光蛋白相关的研究开展不久,尤其是新型荧光蛋白sGFP的发现和应用在最近一两年才开始,因此我们与国际领先水平站在同一起跑线上。 目前国际上对目的蛋白前后接多个Tag的很多,如His, MBP, GST等,但是具体应用至商业化生产上的的不算多,而国内用多标签进行商业化生产几乎...(查看更多)
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