基本信息
- 项目名称：
- The Clinical Significances of α-Adducin Gene G614T
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 生命科学
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 检测浙江地区原发性高血压病人α-内收蛋白（ADD1基因）G460T单核苷酸多态性（SNP）。以健康人外周血样本为对照，收集浙江地区原发性高血压病人外周血血样，提取基因组DNA。以酶切法检测α-内收蛋白G460T的点突变频率，结合临床资料探讨α-内收蛋白的点突变在原发性高血压发病过程中的意义。
- 详细介绍：
- 目的：探讨浙江地区原发性高血压患者α-内收蛋白G460T突变与原发性高血压发生、发展、转归之间的相关性。基本思路：检测浙江地区原发性高血压病人α-内收蛋白（ADD1基因）G460T单核苷酸多态性（SNP）。以健康人外周血样本为对照，收集浙江地区原发性高血压病人外周血血样，提取基因组DNA。以酶切法检测α-内收蛋白G460T的点突变频率，结合临床资料探讨α-内收蛋白的点突变在原发性高血压发病过程中的意义。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 检测浙江地区原发性高血压病人α-内收蛋白（ADD1基因）G460T单核苷酸多态性（SNP）。以健康人外周血样本为对照，收集浙江地区原发性高血压病人外周血血样，提取基因组DNA。以酶切法检测α-内收蛋白G460T的点突变频率，结合临床资料探讨α-内收蛋白的点突变在原发性高血压发病过程中的意义。
科学性、先进性及独特之处
- 科学性：依托本校成熟的分子生物学平台，杭州市第一人民医院大量的临床样本与完善的临床资料，采用PCR-RFLP检测方法完成原发性高血压（EH）患者ADD1 基因G614TSNP的检测。先进性：发现α-内收蛋白T等位基因携带者伴随有高水平的血浆LDL。对患者按性别分组后发现女性EH组LDL水平无差异，而男性组有显著性差异。
应用价值和现实意义
- 本研究结果显示在浙江地区人群中α-内收蛋白基因G614T多态性与原发性高血压（EH）有关。这一突变可为评估男性EH病人罹患其他心血管系统疾病，如动脉粥样硬化等，进行一定的预测。
学术论文摘要
- ABSTRACT BACKGROUND To examine the association between α-adducin gene G614T mutation and risk of essential hypertension. METHODS
获奖情况
- 2010年3月 浙江医学高等专科学校学报 中文论文发表 2010年6月 浙江医学高等专科学校 学生处（学工部） 2009年度学生科技教学文化成果奖励二等奖 2010年11月 浙江医学高等专科学校首届“求真杯”大学生课外学术科技作品竞赛三等奖 2010年12月 Clinia Chimica Acta 修回
鉴定结果
- 无
参考文献
- 现有技术： 聚合酶链式反应（PCR）是模拟体内DNA复制条件在体外酶促合成特异DNA片段的循环反应，可使目的DNA片段得以迅速扩增。其主要步骤是：将待扩增的模板DNA置于高温(约93℃-95℃)下使之变性解链；人工合成的两个寡核苷酸引物在低温(约50℃-70℃)下分别与目的DNA片段两侧的互补序列复性结合；引物在DNA聚合酶作用（约70℃-75℃）下沿模板按5’→3’方向延伸，合成目的DNA片段的新互补链。如此经过n个周期，理论上扩增2n倍,一般PCR经30-40周期后可获得百万倍以上的目的DNA。 聚合酶链式反应—限制性片段长度多态（PCR— RFLP）分析技术是在PCR技术基础上发展起来的。DNA碱基置换正好发生在某种限制性内切酶识别位点上，使酶切位点增加或者消失，利用这一酶切性质的改变，PCR特异扩增包含碱基置换的这段DNA，经某一限制酶切割，再利用琼脂糖凝胶电泳分离酶切产物，与正常比较来确定是否变异。应用PCR— RFLP，可检测某一致病基因已知的点突变，进行直接基因诊断，也可以此为遗传标记进行连锁分析进行间接基因诊断。
同类课题研究水平概述
- 内收蛋白是由α、β、γ三种亚单位构成的异源二聚体或异源四聚体，以二聚体为主要存在形式。内收蛋白是蛋白激酶C和蛋白激酶A的底物。受Ca/钙调蛋白、蛋白激酶C和蛋白激酶A的调节，参与细胞信号传导。同时，内收蛋白还与膜骨架的其他成分（如血影蛋白和肌动蛋白等）及多种膜蛋白（如离子通道、交换体和离子泵等）相互作用参与细胞膜离子转运，尤其与多种细胞膜Na+转运、Na+-H+交换、Na+-K+-Cl-协同转运系统、Na+-Li+反转运密切相关，内收蛋白还能刺激Na+-K+-ATP酶的活性，增加肾小管钠的重吸收。此外，内收蛋白还能与肌动蛋白丝的钩端（或快速牛长端）结合，从而阻止肌动蛋白丝的延长和解聚。在近曲小管中，与膜收缩蛋白和肌动蛋白结合的内收蛋白还与Na+-K+-ATP酶在细胞表面的定位有关，而且肌动蛋白的多聚化可引起Na+-K+-ATP酶与Na+的亲和力增加，酶活性升高。内收蛋白在不同的物种间是高度保守的。
