主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
PNRSV单克隆抗体及其ELISA检测试剂盒的制备
小类:
生命科学
简介:
我国对PNRSV的ELISA检测均依赖于国外的抗血清。价格昂贵,检测的成本非常高。该作品在制备了针对PNRSV的单克隆抗体的基础上,开发了检测田间植物中是否携带PNRSV的ELISA检测试剂盒。试剂盒开发的技术含量高,但试剂盒使用时的技术含量低,对仪器设备要求低,适于推广至乡镇级基层检验检疫部门的工作人员操作使用,应用前景广阔。
详细介绍:
应用杂交瘤技术制备了3株分泌针对李属坏死环斑病毒(PNRSV)单抗的细胞株,分别命名为1D11、2G7和4H2。三种抗体均只与PNRSV发生反应,不与近似种李属矮缩病毒、苹果茎痘病毒和苹果褪绿叶斑病毒等的抗原发生交叉反应,在检测了单抗效价和检测灵敏度的基础上,建立了1D11稀释10000倍,酶标二抗稀释5000倍,植物样品的检测浓度为50mg/mL的间接ELISA检测系统用...(查看更多)

作品专业信息

设计、发明的目的和基本思路、创新点、技术关键和主要技术指标

一、目的 制备基于单克隆抗体的能检测出李属坏死环斑病毒(PNRSV)的ELISA检测试剂盒,帮助各出入境检验检疫局、基层植物保护站、植物检疫站工作人员解决可以快速、准确地鉴定近几年新入侵我国的植物病毒PNRSV的难题。 二、基本思路 1. 应用杂交瘤技术,通过动物免疫、细胞融合、细胞克隆化培养及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,筛选出能分泌针对PNRSV的单克隆抗体的细胞株; ...(查看更多)

科学性、先进性

基于单克隆抗体的ELISA解决了多抗血清容易产生交叉反应的问题,它将McAb与抗原的免疫反应以及酶的高效催化反应有机的结合在一起,具有检测灵敏度高、特异性强、仪器简单、自动化程度高、检测田间样本多等特点。很好的解决了植物病毒很难用传统的生物学方法和电镜检测法进行鉴定的难题。此外,该方法的核心技术是要制备出高度特异性的McAb。这一部分工作的技术含量高,要求有专业实验室、先进的...(查看更多)

获奖情况及鉴定结果

作品所处阶段

实验室阶段

技术转让方式

技术入股

作品可展示的形式

实物、产品

使用说明,技术特点和优势,适应范围,推广前景的技术性说明,市场分析,经济效益预测

利用基于单克隆抗体的ELISA检测试剂盒具有检测特异性高、成本低、时间短、检测量大、操作方便等优点,经济效益十分明显。 本试剂盒适于各出入境检验检疫局、植物保护站和植物检疫站的基层工作人员使用,原因如下:(1)只要按照试剂盒说明书即能完成检测;(2)基层工作单位具备恒温培养箱、普通冰箱和微量移液枪等简单的设备,(3)试剂盒提供全部试剂,能保证试剂盒的推广应用。 ...(查看更多)

同类课题研究水平概述

1 国外的研究及发展 Valleau(1932)首次在李和桃树上发现PNRSV造成的危害。目前,该病的发生已遍及欧洲、亚洲、非洲、南美和北美洲及大洋洲的40多个国家和地区。普遍危害欧洲大樱桃、酸樱桃、桃、苹果、杏和洋李等李属和蔷薇属植物,此外还侵染烟草、西瓜、菜豆、豌豆、草木樨、莴苣、向日葵等草木寄主。2002年Verma等又报道了新的寄主秋海棠。 据国外研究,该...(查看更多)
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