基本信息
- 项目名称:
- 黑龙江省科技厅项目(编号:GB06B204-4)和黑龙江农垦总局项目(HNKXIV-08-05a)
- 来源:
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类:
- 生命科学
- 大类:
- 自然科学类学术论文
- 简介:
- 无
- 详细介绍:
- 无
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 本试验以初生籽鹅为研究对象,选择GAPDH、ACTB、SDH、HPRT1、18S rRNA、28S rRNA、和β-tubulin共7个内参基因,通过实时定量PCR技术检测新生籽鹅五种组织中各内参基因表达水平,比较这些常用内参基因的表达稳定性,为进一步研究籽鹅组织相关基因表达奠定基础。
科学性、先进性及独特之处
- 本研究通过SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法对籽鹅组织中内参基因的选择做了系统的比较分析。
应用价值和现实意义
- 确定了新生籽鹅五种组织中常用的7个候选内参基因表达水平,最终确定了新生籽鹅组织中最佳的内参基因及其数目,为进一步研究籽鹅组织相关基因表达奠定基础。
学术论文摘要
- 分别以1日龄健康籽鹅肝脏、肾脏、心脏、肌肉和卵巢为研究对象,应用实时定量反转录PCR技术,探讨28S rRNA、18S rRNA、GAPDH和ACT、HPRT1、SDH和TUB七个内参基因mRNA的表达水平。经过geNorm和NormFinder程序分析,结果显示7个内参基因稳定度由高到低为GAPDH=HRPT1 >28S rRNA > TUB > SDH > ACT > 18S rRNA;基因表达的稳定值分别为0.215(GAPDH)、0.215(HRPT1)、0.339(28S rRNA)、0.471(TUB)、0.721(SDH)、0.888(ACT)、1.177(18S rRNA),结果表明GAPDH和HRPT1两个内参基因适合用于目的基因表达的校正。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- [4] Vandesompele J,De Preter K,Pattyn F,et al.Accurate normalization of real-time quantitative RT-PCR data by geometric averaging of multipleinternal control genes[J].Genome Biology,2002,3(7):1~11. [5] Claus L A,Jens L J,Torben F O.Normalization of real-time quantitative reverse transcription-PCR data:A model-based variance estimation approach to identify genes suited for normalization,applied to bladder and colon data sets[J].Cancer Research,2004,64:5245~5250. [6] Infante C,Matsuoka M P,Asensio E,et al.Selection of house-keeping genes for gene expression studies in larvae from flatfish using real-time PCR[J].BMC Mol Biol,2008(9):28. [8] Suzuki T,Higgins P J,Crawford D R.Control selection for RNA quantitation[J].Biotechniques,2000,29(2):332~337.
同类课题研究水平概述
- 目前关于内参基因选择方面的研究尚不全面,且籽鹅组织中内参的选择尚未见报道。