基本信息
- 项目名称：
- 毛细管电泳法测定葛根中的葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的含量
- 来源：
- 第十二届“挑战杯”省赛作品
- 小类：
- 能源化工
- 大类：
- 自然科学类学术论文
- 简介：
- 通过实验，可找出超声法提取葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的最佳条件（包括提取溶剂、温度、时间、功率等）以及毛细管电泳法分离测定葛根中以上成分的最佳条件（包括缓冲体系的组成、浓度、pH值、分离温度、分离电压、检测波长等），建立起超声提取-毛细管电泳法分离测定葛根中有效成分的方法，并对葛根中的有效成分进行测定。
- 详细介绍：
- 中药葛根为豆科植物野葛及干葛藤的干燥根，具有解肌退热、生津止渴、透疹、升阳止泻、活血疗疮和解酒等功效，可用于治疗外感发热头痛、项强、口渴、麻疹不透、热痢、泄泻、高血压、高血糖等症[1，2]。葛根中有丰富的黄酮类和异黄酮类化合物，如葛根素、大豆苷和大豆苷元等。其中，葛根素是一种被临床证明的安全、有效的治疗缺血性心脏病及脑血管微循环障碍的药物，可用于治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死、视网膜动静脉阻塞、突发性耳聋等疾病[3]；大豆苷具有抗癌、防治心血管疾病、抗病毒及保肝等作用[4-8], 可抑制S180、YAC - 1和P815细胞的DNA合成, 并对人红白血病细胞系K562及YAC-1细胞有明显的细胞毒作用[9]； 大豆苷元具有雌激素和抗雌激素样作用、抗肿瘤、抗骨质疏松、抗氧化、保护心脑血管、提高机体免疫力及影响内分泌系统等多种药理作用[10]；芦丁则具有抗炎、抗病毒、抗癌、清除自由基和维生素P样作用，可用于糖尿病、高血压、脑溢血的辅助治疗, 是很有潜力的抗癌化合物[11]。建立简单、快速、准确地测定葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的分析方法有一定的现实意义。
作品专业信息
撰写目的和基本思路
- 中药葛根中有丰富的黄酮类和异黄酮类化合物，如葛根素、大豆苷和大豆苷元等，是葛根的活性成分。葛根具有抗癌、抗炎、抗病毒、抗骨质疏松、抗氧化、提高机体免疫力及保肝等作用，是一种被临床证明的安全、有效的治疗缺血性心脏病及脑血管微循环障碍的药物，可用于治疗冠心病、心绞痛、心肌梗死、视网膜动静脉阻塞、突发性耳聋等疾病，还可用于治疗外感发热头痛、项强、口渴、麻疹不透、等症。
科学性、先进性及独特之处
- 毛细管电泳法由于具有快速、高效、分辨率高、分离模式多、样品和试剂消耗量少等优点，被广泛用于复杂样品中各组分的分离分析中。用超声提取-毛细管电泳法同时分离测定葛根中的葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的含量目前尚未见报道，所建立的方法简便、快速、灵敏度高、准确度好，且操作费用低，环保，在12min内实现了葛根中4种有效活性成分的分离测定。
应用价值和现实意义
- 所建立的方法对中药葛根的质量控制有重要的意义，也可以将其推广到葛根中成药及其制剂中有效活性成分的分离测定中。
学术论文摘要
- 建立了高效毛细管电泳同时分离和检测葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁含量的方法，考察了缓冲溶液pH 值、工作电压、温度等对测定结果的影响。以30mmol.L-1硼酸－30mmol.L-1硼砂－20mmol.L-1SDS溶液（pH=8.65）为背景电解质，工作电压19 KV, 分离温度19℃, 检测波长为254nm，上述四组分在12min内完全分离。葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的浓度与峰面积分别在 1. 0～1350 mg.L-1、2. 0～1400mg.L-1、0.7～1200 mg.L-1和0.8～1300 mg.L-1 范围内呈良好的线性关系，检出限分别为0.1608、0.1734、0.1452、0.2454 mg.L-1。
获奖情况
- 无
鉴定结果
- 无
参考文献
- 1]吕元琦 ,李新民 ,袁倬斌. 毛细管胶束电动色谱法快速测定葛根素和大豆甙元[J].化学工程师, 2005, (1)：28-32. [2]罗奇志，戴开金，马安德, 等. 葛根芩连汤及微丸中葛根素、大豆苷元的HPCE分析[J].药物分析杂志，2004，24（1）: 11- 13. [3]孙立华，胡永明，邹德禄, 等.高效毛细管电泳法测定葛根及其制剂脑得生片中葛根素的含量[J]. 中国药学杂志，2000，35（10）: 694- 696.
同类课题研究水平概述
- 国内外学者对葛根及其制剂中有效活性成分的测定，目前多限于单一成分或2～3种成分。用高效液相色谱法测定常常需要使用有毒的甲醇或乙腈流动相，且分析时间较长，满晨等[1] 以C18 为色谱柱, 以甲醇∶水( 25∶75) 为流动相，用高效液相色谱法在30min内测定了葛根中葛根素的含量；何建涛等[2] 以C18 为色谱柱, 以乙腈-和0. 02 mol/L 磷酸二氢钾为流动相进行梯度洗脱，在30min内测定了心可舒片中葛根素和大豆苷元的含量；用薄层色谱法测定也需要使用有毒的甲醇等展开剂[3]；用分光光度法，只能测定单一组分的含量，且选择性欠佳[4]；毛细管电泳法由于具有快速、高效、分辨率高、分离模式多、样品和试剂消耗量少等优点，被广泛用于复杂样品中各组分的分离分析中。孙立华等[5]用毛细管电泳法测定了葛根及其制剂脑得生片中葛根素的含量。吕元琦[6] 和罗奇志[7]等分别用毛细管胶束电动色谱和毛细管区带电泳法快速测定了葛根、葛根芩连片和葛根芩连汤及微丸中葛根素和大豆甙元的含量。而用毛细管电泳同时分离和检测葛根中葛根素、大豆苷、大豆苷元和芦丁的含量尚未见报道，我们建立的分离分析方法具有简便、快速、灵敏度高、准确度好、操作费用低且环保的优点，对葛根及其制剂的质量评价及进一步开发利用有一定的借鉴作用。
