为提高云南松成熟胚胚性愈伤组织的诱导及增殖率，为其体胚发生体系提供支持。以云南松成熟合子胚为外植体，用正交设计探索诱导愈伤组织的最适激素浓度配比及消毒方式。用不同方法增殖胚性愈伤，观察记录胚性愈伤形成过程。采用正交设计，既减少工作量，又可得到准确结论，填补了激素浓度对云南松胚性愈伤诱导的研究空白。采用固体条件培养增殖法，可以显著提高胚性愈伤增殖率，为体胚发生大规模繁殖云南松奠定了基础。

为提高云南松成熟胚胚性愈伤组织的诱导及增殖率，为建立云南松成熟胚体细胞胚胎发生体系提供支持，以云南松成熟合子胚为外植体，使用正交实验设计，在DCR培养基上诱导胚性愈伤组织，以确定最佳消毒剂用量及激素浓度范围。在此基础上，设计密集梯度的激素浓度配比实验，确定最佳诱导激素浓度配比。用不同的培养方法增殖胚性愈伤组织，并对胚性愈伤组织形成过程中形态学与细胞学变化进行观察。其后提高培养基中肌醇浓度，增大渗透压，添加ABA，诱导早期原胚。结果表明，经5%次氯酸钠消毒20min，使用添加8mg/L 2,4-D、1mg/L 6-BA、500mg/L CH以及500mg/L谷氨酰胺的DCR培养基接种，可获得较高诱导率；采用在愈伤组织周围添加少量培养过该愈伤组织的培养基的方式继代，可以显著提高胚性愈伤组织的增殖率。在增殖培养基中添加ABA后,胚性细胞可逐渐发育形成胚性胚柄团。实验中多次发现，培养过愈伤组织的培养基可能具有促进细胞分裂，提高细胞胚性及抑菌等作用，猜测是愈伤组织形成过程中的自身分泌了相应有促进作用的物质所致。论文明确了云南松成熟胚胚性愈伤组织的最佳诱导条件，采用固体条件培养方式大幅度提高了胚性愈伤组织的增殖率。根据条件培养可以提高胚性愈伤组织的增殖效果的现象，针对胚性愈伤组织的增殖过程及条件培养作用的可能原因进行了初步的分析，对利用云南松成熟胚进行体细胞胚胎发生有较大意义。

第十二届“挑战杯”作品 三等奖
曾作为本校唯一入选的参展项目，于2010年9月代表学校参加教育部高等教育司主办的“第三届全国大学生创新论坛”。相关初期研究成果《云南松成熟合子胚的胚性愈伤组织诱导条件探究》一文已发表于中文核心期刊《浙江林业科技》。（2010年7月 第30卷 第4期）本论文《云南松成熟胚胚性愈伤组织诱导及增殖》已被《西北植物学报》接收，将于年内发表。