本实验项目以纤溶酶活力为指标，通过摇瓶培养方式对蛹虫草的液体发酵条件进行优化处理，确定最佳发酵条件，按拟确定的最佳发酵条件在发酵罐中进行比拟放大，利用层析法对蛹虫草发酵液进行分离提纯，确定最佳分离路线。

对蛹虫草液态发酵产生纤溶酶的培养基和发酵控制参数进行优化，通过分析得到液体发酵产纤溶酶的最佳工艺条件为：蔗糖2%、豆饼5%；250mL三角瓶装液量50mL；发酵时间为5天；蔗糖/豆饼比为2：5；发酵培养基的初始pH值为自然（约6-7之间）；发酵培养接菌量为直径为1cm的菌片1片；最适培养温度为21-25℃。在10L发酵罐中的放大结果显示，在搅拌转速和通风量为100r/min，600L/h的条件下纤溶酶的溶圈面积可达214.28mm2，相当于尿激酶286.21U/mL，较摇瓶条件下的酶活力提高了3.2倍。蛹虫草通过深层发酵产生的纤溶酶经过硫酸铵盐析、Octyl Sepharose FF疏水作用层析、Superdex 75 凝胶过滤层析进行分离纯化。样品经Octyl Sepharose FF疏水作用层分离得到两个活性组分，本实验收集活性组分II进一步纯化，最终纤溶酶活性组分II达到了电泳纯。提纯后的蛹虫草纤溶酶II比活力达到2197.66 U/mg，活力回收率为7.85%，纯化了68.82倍。

第十二届“挑战杯”作品 三等奖
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