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基本信息

项目名称:
食肝源性磷脂酰乙醇胺的分离及其诱导肝癌细胞凋亡的研究
小类:
生命科学
简介:
本实验采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点PE对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,结果表明肝源性PE对癌细胞的增殖抑制作用可能具有组织特异性,这可能与肝脏中特殊的PE代谢路径及其不同分子种类有关。
详细介绍:
采用氧化铝柱色谱法以95%乙醇2氯仿为洗脱剂分离纯化了肝源性磷脂酰乙醇胺(PE) ,并采用GF254 硅胶板薄层色谱法以氯仿2甲醇2水(65: 25: 4,体积比)为展开剂检测PE。结果表明,以95%乙醇2氯仿顺序洗脱。氧化铝色谱柱中的磷脂时, PE与磷脂酰胆碱( PC) 可实现完全分离。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点25μmol/L PE对人肝癌SMMC27721细胞增殖的影响,并与子宫颈癌细胞Hela、正常人肝细胞HL7702做比较,发现肝源性PE对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,且能诱导其发生凋亡。

作品专业信息

撰写目的和基本思路

本实验研究了肝源性PE对人肝癌细胞增殖及凋亡的影响,并与子宫颈癌细胞、正常人肝细胞做比较,发现肝源性PE特异性抑制人肝癌细胞的增殖,并且下调抗凋亡蛋白Bcl-2及上调凋亡执行蛋白Capase-3的表达,肝源性PE可能作为某种信号或信号的载体且能与肝癌细胞表面的受体特异性识别,进而激活了肝癌细胞凋亡过程中关键性调节基。结果提示我们因bcl-2和capase-3的表达,从而诱发肝癌细胞凋亡。

科学性、先进性及独特之处

研究表明,不饱和脂肪酸和多烯磷脂酰胆碱有较为明显的抑制肿瘤细胞增殖及保肝护肝的功效,提示我们肝源性磷脂酰乙醇胺可能具抑制肿瘤细胞增殖的生物学活性。目前对PE的研究主要集中在其作为磷脂双分子层的药物包埋体,但把PE独立作为药物进行生物活性研究的报道较少,本实验应用柱色谱法从肝脏总脂中分离得到PE,并对其抑制肝癌细胞增殖及机制进行了研究,旨在为开发肝源性PE抗肝癌新药提供依据。

应用价值和现实意义

实验表明肝源性磷脂酰乙醇胺具有抑制肿瘤细胞的生物学活性,本实验把PE独立作为药物进行生物活性研究,为开发肝源性PE抗肝癌新药提供依据。

学术论文摘要

采用氧化铝柱色谱法分离纯化肝源性磷脂酰乙醇胺(PE),并采用GF254硅胶板薄层色谱法检测PE分离产生量。采用四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)测定了在不同时间点PE对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,并与子宫颈癌细胞Hela、正常人肝细胞HL7702做比较,发现肝源性PE对肝癌细胞的生长具有明显的抑制作用,并能诱导其发生凋亡,且存在剂量依赖关系。实验结果表明,肝源性PE对癌细胞的增殖抑制作用可能具有组织特异性,这可能与肝脏中特殊的PE代谢路径及其不同分子种类有关。这个结果为今后开发低毒副作用的抗肝癌药物提供了新思路。

获奖情况

(1) 本实验获得大连医科大学基础医学院第四届大学生科技论文 二等奖 (2) 王亮等. 肝源性磷脂酰乙醇胺的分离及其诱导肝癌细胞凋亡的研究.天然产物研究与开发,2010,22(2)

鉴定结果

肝源性PE对癌细胞的增殖抑制作用可能具有组织特异性,这可能与肝脏中特殊的PE代谢路径及其不同分子种类有关。

参考文献

氧化铝柱色谱法;GF254硅胶板薄层色谱法;四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法) Lizard G,Fournel S,Genestier L,et al. Kinetics of plasma membrane and mitochondrial alterations in cells undergoing apoptosis. Cytometry, l995, 21:275

同类课题研究水平概述

磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine,PE)也称脑磷脂。在动、植物及微生物中广泛存在。PE作为生物膜上重要的磷脂组分之一参与维持其正常的结构和功能,与细胞的生长、增殖、分化及癌变密切相关,其降解产物还参与细胞的信号转导和代谢调控,具有防衰老、降血脂、健脑、保肝等多种生理作用。有研究表明,肝源性PE的不饱和脂肪酸含量较高,并且在肝脏中PE与磷脂酰胆碱(phosphatidylcholine,,PC)可以相互转化。同时,不饱和脂肪酸和多烯磷脂酰胆碱有较为明显的抑制肿瘤细胞增殖及保肝护肝的功效,提示我们肝源性PE可能具抑制肿瘤细胞增殖的生物学活性。目前对PE的研究主要集中在其作为磷脂双分子层的药物包埋体[3],但把PE独立作为药物进行生物活性研究的报道较少,本实验应用柱色谱法从肝脏总脂中分离得到PE,并对其抑制肝癌细胞增殖及机制进行了研究,旨在为开发肝源性PE抗肝癌新药提供依据。
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