主办单位: 共青团中央   中国科协   教育部   中国社会科学院   全国学联  

承办单位: 贵州大学     

基本信息

项目名称:
透骨消痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响
小类:
生命科学
简介:
通过采用流式细胞仪检测透骨销痛颗粒干预后兔软骨细胞周期的变化,观察透骨销痛颗粒读兔软骨细胞周期的影响。得出结果:流式细胞仪细胞周期检测显示含药血清能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,干预48h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与空白组相比有显著性差异(P〈0.05)。 结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。
详细介绍:
在中医理论的指导下,运用细胞生物学的研究方法,在前期临床,实验研究的基础上,观察透骨销痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响,旨在从细胞和分子水平探讨透骨销痛颗粒调控软骨细胞周期的作用机制。 方法:含药血清的制备-软骨细胞培养体系建立-软骨细胞鉴定-透骨销痛颗粒含药血清干预方法-流式细胞仪检测软骨细胞周期-统计学处理 结果:流式细胞仪细胞周期检测显示含药血清能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,干预48h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与空白组相比有显著性差异(P〈0.05)。 结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。

作品专业信息

撰写目的和基本思路

目的:探讨透骨消痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响。 基体思路:取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨,Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第三代软骨细胞随机分为3组,各加入培养液,再分别加入10%PBS、空白血清和含药血清,继续培养48h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。

科学性、先进性及独特之处

(1)首次采用中药制剂对体外培养的永生化软骨细胞凋亡过程中bc1-2、p53表达及端粒酶活性影响的研究。 (2)该研究有望成为永生化软骨细胞形成中药新药研究的作用靶点。

应用价值和现实意义

本项目采用透骨销痛颗粒血清为受试药物,通过含药血清作用于软骨细胞体外培养的软骨细胞,从细胞水平来探索关节软骨生物学特性,从而模拟了透骨消痛颗粒在体内发生作用的过程,结果表明透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。为探索中药对骨性关节炎骨性关节炎(Osteoarthritis,OA)作用环节提供了有效而简便的方法。具有良好的推广前景。

学术论文摘要

摘要:目的:探讨透骨消痛颗粒对兔软骨细胞周期的影响。方法:取4周龄新西兰兔膝关节关节软骨,Ⅱ型胶原酶消化,建立软骨细胞体外培养体系,体外培养第三代软骨细胞随机分为3组,各加入培养液,再分别加入10%PBS、空白血清和含药血清,继续培养48h后,采用流式细胞仪检测软骨细胞周期的变化。结果:流式细胞仪细胞周期检测显示含药血清能够刺激软骨细胞由G0/G1期进入S期和G2/M期,干预48h后G0/G1期细胞比例降低,S期与G2/M期细胞之和增加,与空白组相比有显著性差异(P〈0.05)。 结论:透骨消痛颗粒含药血清能有效促进软骨细胞的增殖。 关键词: 透骨消痛颗粒;含药血清;细胞增殖;细胞周期

获奖情况

鉴定结果

参考文献

参考文献 1 刘献祥,李西海,周江涛. 改良Hulth造模法复制膝骨性关节炎的实验研究[J].中国中西医结合杂志,2005;25(12):1104-1108. 2 刘献祥,李西海,周江涛. 透骨消痛颗粒防治膝骨性关节炎的机理研究[J].中国中西医结合杂志,2007;27(1):50-54. 3 刘献祥,周江涛,李西海. 透骨消痛颗粒对骨性关节炎组织形态学的影响[J].中医正骨,2005;17(10):3-5. 4 李西海,梁文娜,刘献祥,等.端粒和端粒酶与永生化软骨细胞[J].国际骨科学杂志,2007;28(6):351-352. 5 徐淑云,卞如濂,陈修.药理实验学方法[M].第3版.北京:人民卫生出版社,2002:202. 6 田代真一.“药物血清学”と“血清药化学”一汉方の药理学か始きっ药物血中浓度测定の新しぃ世界[J].TDM研究,1988;54(5):11.

同类课题研究水平概述

透骨消痛颗粒由著名中医骨伤专家许书亮教授提供,长期运用于临床,由巴戟天、淫羊藿、杭白芍、青风藤、制川乌、泔苍术、防风、当归、川芎、怀牛膝、羌活、独活组成。透骨消痛颗粒长期运用于临床,是防治骨性关节炎(osteoarthritis,OA)行之有效的组方,研究表明透骨消痛颗粒具有延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变的用。《杏林信息》2003年第1期刊登“许书亮教授验方精华”中介绍了透骨消痛方。“透骨消痛颗粒治疗骨性关节炎的实验研究”获2003年福建省教育厅科研基金资助,“透骨消痛颗粒诱导BMSCs向软骨分化及转录因子表达影响的研究”获2005年福建省自然科学基金资助。研究结果如下:(1)透骨消痛颗粒通过有效抑制细胞因子、MMP-3、氧自由基的生物效应来延缓软骨的退变[19];(2)具有延缓关节宏观形态、软骨基质及软骨细胞退变的作用[20];(3)透骨消痛颗粒醇提物含药血清对体外培养的鼠骨髓基质细胞增殖、诱导骨髓基质细胞向软骨分化及Sox9、Cafal的表达有增加作用[21];(4)临床透骨消痛方防治膝骨性关节炎(早、中期)有较好疗效[22]。
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